สำหรับเส้นทางปั่นเสือหมอบจากเดิมระยะ 80 กม. มีการเปลี่ยนแปลงเส้นทางเพื่อความปลอดภัยในการปั่น จนทำให้ระยะที่ปั่นจริงจะประมาณ 70 กม.ตามที่แสดงในแผนที่ โดยจุดสตาร์ทจะปล่อยตัวจากหน้าเขื่อน ผ่านวงเวียน และออกมาทางเส้นทางหลักผ่านวังตะไคร้ ผ่านสี่แยกประชาเกษม ผ่านตลาดอินโดจีน วัดหลวงพ่อปากแดง จนถึงแยกบุ่งกระเบา จะเลี้ยวขวาเข้าถนนบายพาส ผ่านไฟแดงแรก ตรงยาวๆไปจนถึง ไฟแดงที่สอง เลี้ยวขวาเข้าโรงเรียนนายร้อย จปร. ประตูเล็ก ผ่านเข้าไปตามถนนด้านในอ้อมด้านหลังโรงเรียนจนออกมายังประตูหลักของโรงเรียน มุ่งหน้าตรงมายังสี่แยกจ จปร. เลี้ยงซ้ายเข้าถนนสุวรรณศร จนมาถึงแยกบายพาส เลี้ยวซ้ายเข้าถนนบายพาส ผ่านอีกสองไฟแดงใหญ่(เราจะไม่กลับเขื่อนเส้นทางเดียวกับที่เรามานะครับ) ผ่านสะพานข้ามแม่น้ำนครนายก เลี้ยวซ้ายในไฟแดงถัดไปมุ่งหน้าศรีนาวา(จะเป็นถนนสองเลนที่มุ่งหน้าเข้าเขื่อนอีกเส้นหนึ่ง) เข้าสู่ประตูเขื่อน ช่วงนี้ระวังเนินชะลอหน้าประตูซึ่งค่อนข้างนูนมาก ถ้าจับแฮนด์ไม่แน่นหรือไม่ระวังอาจล้มได้ ปั่นผ่านหน้าเขื่อน ผ่านวงเวียน ขึ้นเขื่อน ระหว่างทางจะมี 3 เนินหลักๆ เส้นชัยอยู่ด้านบนห่างจากเนินสุดท้านประมาณ50 เมตร....เหลือแรงไว้สปริ๊นซ์หน้าเส้นซักนิด ป้ายหน้ารถขอให้ช่วยติดให้กรรมการมองเห็นง่ายๆหน่อยนะครับ
4 รุ่นที่จะได้รับถ้วยพระราชทาน คือผู้ที่เข้าอันดับ 1 ของรุ่น เสือหมอบทั่วไปชาย หมอบทั่วไปหญิง เสือภูเขาทั่วไปชาย เสือภูเขาทั่วไปหญิง อันดับถัดไปจะเป็นถ้วยอันดับ 1 ถึง 5 ...ซึ่งต้องอยู่ในเงื่อนไขเป็นผู้ที่มีรายชื่อในการสมัครหรือแก้ไขชื่อก่อนวันที่ 5 เมษายน 2559 และต้องไม่มีการปั่นผิดกติกาเช่นลัดเส้นทาง ดราฟนักปั่นต่างรุ่น ดราฟรถยนต์ ปล่อยตัวพร้อมนักปั่นที่ไม่ได้อยู่ในรุ่นเดียวกัน มาแชลหลังจากเตือนแล้วสามารถตัดสิทธิ์ในกรณีที่ปั่นผิดกติกาได้ นักปั่นสามารถประท้วงหลังเข้าเส้นภายใน 15 นาที
